紫景天對實(shí)驗(yàn)性牙周炎牙周組織病理作用的研究規(guī)章制度

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1、紫景天對實(shí)驗(yàn)性牙周炎牙周組織病理作用的研究規(guī)章制度 紫景天對實(shí)驗(yàn)性牙周炎牙周組織病理作用的研究 本文關(guān)鍵詞：牙周炎，實(shí)驗(yàn)性，景天，病理，作用 紫景天對實(shí)驗(yàn)性牙周炎牙周組織病理作用的研究 本文簡介：牙周炎（CP）是一種慢性炎癥性疾病，是由齦下微生物和宿主防御之間的穩(wěn)態(tài)破壞引起[1],當(dāng)牙周組織被破壞時(shí)，牙周袋內(nèi)的微生物負(fù)荷壓倒系統(tǒng)的主動(dòng)防御機(jī)制[2].針對此種狀況，目前國內(nèi)外對牙周炎的藥物治療主要是牙周袋內(nèi)用藥，而此類藥物主要以抗生素為主，近幾年研究顯示抗生素的長期使用可加快細(xì)菌的進(jìn)化，出現(xiàn)耐 紫景天對實(shí)驗(yàn)性牙周炎牙周組織病理作用的研究 本文內(nèi)容： 　　牙周炎 （CP） 是一種慢性炎癥性

2、疾病， 是由齦下微生物和宿主防御之間的穩(wěn)態(tài)破壞引起[1], 當(dāng)牙周組織被破壞時(shí)， 牙周袋內(nèi)的微生物負(fù)荷壓倒系統(tǒng)的主動(dòng)防御機(jī)制[2].針對此種狀況， 目前國內(nèi)外對牙周炎的藥物治療主要是牙周袋內(nèi)用藥， 而此類藥物主要以抗生素為主， 近幾年研究顯示抗生素的長期使用可加快細(xì)菌的進(jìn)化， 出現(xiàn)耐藥菌株， 也可破壞人體內(nèi)正常菌群， 造成菌群失調(diào)等副作用。因此， 我們進(jìn)行了紫景天總黃酮凝膠對實(shí)驗(yàn)性牙周炎牙周組織病理作用的相關(guān)研究。 　　 　　1 材料與方法 　　 　　1.1 試劑及儀器 　　 　　二甲苯 （__化工廠， 批號：110315） ;冰醋酸 （西隴化工股份有限公司生產(chǎn)， 批號：12030

3、2） ;磨牙機(jī) （吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院口腔科提供） ;Wistar大鼠， 體重180-230g, 雌雄各半 （吉林大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供） . 　　 　　1.2 樣品的純度、來源 　　 　　濃度分別為1.0%、0.5%、0.25%的紫景天總黃酮凝膠；基質(zhì)16%泊洛沙姆407 （吉林省中醫(yī)藥科學(xué)院制劑室， 批號：0725） 以及陽性對照組藥物：復(fù)方牙痛酊 （貴州同濟(jì)堂制藥有限公司， 批號：） . 　　 　　1.3 絲線結(jié)扎加牙齦卟啉菌感染復(fù)合法建立大鼠實(shí)驗(yàn)性牙周炎模型 　　 　　取Wistar大鼠60只， 雌雄各半， 分籠圈養(yǎng)， 隨機(jī)取出50只大鼠， 用牙齦卟啉單胞菌的鹽水預(yù)處理2

4、小時(shí)后的4號無菌絲線若干， 雙股在同一位置打結(jié)3次后， 再穿過大鼠的第一和第二磨牙之間的間隙， 再將絲線環(huán)繞過第一磨牙， 于其腭側(cè)間隙結(jié)扎， 然后打結(jié)3次， 將打好的結(jié)頭埋入牙齦組織下， 以便使線結(jié)持續(xù)刺激到牙齦組織。在第3, 5, 7天將等量牙齦卟啉單胞菌的鹽水注射到大鼠頰腭側(cè)埋有絲線結(jié)頭的齦下， 于處理大鼠后的第3周通過國際通用標(biāo)準(zhǔn)和觀察牙齦癥狀評價(jià)牙齦指數(shù)并記錄牙齦指數(shù)。第4周隨機(jī)取動(dòng)物2只， 通過獲取打結(jié)部位的上頜磨牙及其牙周組織進(jìn)行病理組織學(xué)觀察， 以確認(rèn)實(shí)驗(yàn)組大鼠模型的成立。 　　 　　1.4 紫景天總黃酮對實(shí)驗(yàn)性牙周炎的治療作用 　　 　　1） 未處理的10只大鼠為正常對

5、照組 （A組） :對牙齦不做任何處理， 其他方面同模型組大鼠。將上述大鼠實(shí)驗(yàn)性牙周炎模型動(dòng)物隨機(jī)的分成4組：模型對照組 （B組） 以及陽性對照藥復(fù)方牙痛酊組 （C組） .根據(jù)紫景天總黃酮給藥的劑量的不同濃度分為實(shí)驗(yàn)D組 （給予1.0%紫景天總黃酮） , 實(shí)驗(yàn)E組 （給予0.5%紫景天總黃酮） 及實(shí)驗(yàn)F組 （給予0.25%紫景天總黃酮） , D、E和F組分別牙齦涂擦紫景天總黃酮， 每日2次， 0.5 ml/次/只， 次間隔8h, 連續(xù)涂藥14天。C組牙齦涂擦復(fù)方牙痛酊， 方法同紫景天藥物實(shí)驗(yàn)組。 　　 　　2） 牙齦指數(shù) （GI） 和齦溝出血指數(shù) （SBI） :于給藥后第15天， 以3%水合

6、氯醛10 ml/kg腹腔注射麻醉， 觀察并記錄藥后牙齦指數(shù)及齦溝出血指數(shù)， 然后腹主動(dòng)脈取血， 測量血清中的超氧化物歧化酶 （SOD） 、谷胱甘肽過氧化物酶 （GSH） 、丙二醛含量 （MDA） . 　　 　　3） 牙周組織病理學(xué)觀察：在實(shí)驗(yàn)開始后的第5周處死各組大鼠進(jìn)行觀察， 首先將獲取的上頜骨標(biāo)本， 經(jīng)PBS （pH=7.2） 溶液清洗2遍后， 用10%甲醛固定上頜骨標(biāo)本24h, 將標(biāo)本浸泡在70%乙醇溶液中， 將組織修正后， 通過脫鈣、梯度脫水、石蠟包埋技術(shù)處理組織， 然后將牙齒進(jìn)行平行于牙長軸的近遠(yuǎn)中方向切片處理， 獲取牙體牙周聯(lián)合切片， 厚度約為5m.將切片進(jìn)行蘇木素-伊紅 （H

7、E） 染色， 通過光鏡組織學(xué)觀察并記錄組織學(xué)變化， 分析結(jié)果。 　　 　　2 結(jié)果 　　 　　2.1 外部行為觀察和組織病理學(xué)檢查 　　 　　由圖1結(jié)果所見， 肉眼觀察：正常對照組動(dòng)物 （如圖A組） 牙齦色粉紅， 質(zhì)韌， 菲薄且緊貼牙面；模型組動(dòng)物可見牙面上有大量牙石菌斑， 且牙齦色暗紅質(zhì)地疏松， 探之易出血， 牙周袋形成。第4周處死兩只動(dòng)物， 取牙及牙周組織進(jìn)行病理組織學(xué)檢查， 確認(rèn)牙周炎模型復(fù)制成功。第5周開始給藥， 此時(shí)模型組動(dòng)物組， 牙周袋可見進(jìn)一步加深， 內(nèi)有食物殘?jiān)奂?牙齦組織出血、糜爛、溢膿等癥狀加重；給藥兩周后觀察可見模型對照組 （B組） 癥狀加重， 紫景天藥物

8、實(shí)驗(yàn)組 （D、E、F組） 及陽性對照藥復(fù)方牙痛酊組 （C組） 動(dòng)物牙齦顏色變淺， 出血減少， 牙周袋變淺。 　　 　　正常對照組動(dòng)物 （A組） 牙周軟組織細(xì)胞大小、形態(tài)及分布正常， 鏡下可見大鼠的牙周膜的附著點(diǎn)位于其牙齒的釉牙骨質(zhì)界處， 牙槽骨的骨小梁排列致密， 且不可見牙槽骨吸收破壞等變化。模型組對照組 （B組） 牙周組織可見大量炎性細(xì)胞；溝內(nèi)上皮出現(xiàn)糜爛潰瘍， 上皮部分向根方向增生， 牙周膜附著位于釉牙骨質(zhì)界下方， 可見深牙周袋形成；牙槽骨內(nèi)發(fā)現(xiàn)骨吸收陷窩， 判斷出現(xiàn)破骨細(xì)胞性骨吸收， 并可見中重度牙周炎的組織病變。陽性對照復(fù)方牙痛酊組 （C組） 大鼠的牙周組織雖然依然有炎性細(xì)胞的浸潤

9、， 但是其數(shù)量明顯減少。C組病理變化與陽性藥相似；F組大鼠的軟組織中炎性細(xì)胞的浸潤可見明顯減輕， 牙槽骨吸收狀態(tài)處于靜止期， 可見牙槽骨中的破骨細(xì)胞有明顯減少， 且牙槽骨周圍可見大量的成骨細(xì)胞增生， 并且有新生纖維結(jié)締組織大量生成， 牙周袋的變化顯示變淺或消失， D組炎性病變明顯大于E組， 而E組變化明顯大于F組， 但是D、E、F組炎性變化明顯小于B組， 這些顯示牙周組織正處于修復(fù)階段。 　　 　　2.2 對實(shí)驗(yàn)性牙周炎大鼠牙齦指數(shù)、齦溝出血指數(shù)的影響 　　 　　由圖2、3結(jié)果可見， 紫景天總黃酮1.0%和復(fù)方牙痛酊均可明顯降低牙齦指數(shù)及齦溝出血指數(shù)， 明顯減輕牙周炎損傷程度， 與模型

10、對照組比較均有顯著差異， 對大鼠實(shí)驗(yàn)性牙周炎有明顯的治療作用。 　　 　　2.3 對實(shí)驗(yàn)性牙周炎大鼠血清中SOD、GSH、MDA的影響 　　 　　由圖4、5結(jié)果可見， 模型組血清中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶比對照組明顯降低， 丙二醛含量明顯升高， 紫景天總黃酮1.0%、0.5%和復(fù)方牙痛酊均可明顯升高大鼠血清中超氧化物歧化酶 （P0.01） 、谷胱甘肽過氧化物酶 （P0.05） , 降低丙二醛含量。表明紫景天總黃酮及復(fù)方牙痛酊均可明顯減輕對大鼠實(shí)驗(yàn)性牙周炎的損傷程度， 對實(shí)驗(yàn)性牙周炎具有顯著的治療作用。 　　 　　3 討論 　　 　　盡管在目前的醫(yī)學(xué)和整體健康方面有了長

11、足的進(jìn)步， 但是慢性牙周炎仍然是一種廣泛的疾病， 失去牙齒是這種特殊疾病最嚴(yán)重的并發(fā)癥[3], 該病的特點(diǎn)是由于牙周韌帶和相鄰支撐骨的破壞而失去臨床附著。它普遍存在于成人之中[4], 它的主要病理變化為牙槽骨的病理性吸收?，F(xiàn)如今對牙周炎治療的藥物， 主要著力于控制或消除炎癥并且進(jìn)一步促進(jìn)牙周組織的再生成。臨床上主要應(yīng)用藥物是用于控制炎癥并且阻斷牙槽骨吸收和促進(jìn)骨再生。目前臨床上牙周炎的藥物治療主要是針對牙菌斑細(xì)菌的抗生素的治療方法， 此類治療藥物對于治療牙周炎有較好的療效， 但是如果長期使用易導(dǎo)致耐藥細(xì)菌的增多， 從而導(dǎo)致口腔內(nèi)菌群的失調(diào)， 某些藥物也可同時(shí)引起胃腸道刺激性等毒副作用。因此需研

12、究并且開發(fā)高效低毒的牙周炎治療的藥物以應(yīng)用在臨床治療中。因此我們進(jìn)行了紫景天對實(shí)驗(yàn)性牙周炎牙周組織的病理作用的研究， 以給相關(guān)研究提供相應(yīng)證據(jù)。 　　 　　通過本研究， 我們發(fā)現(xiàn)紫景天總黃酮可以減輕牙周炎的病理性損傷， 抑制牙周炎中的牙槽骨吸收。在大鼠實(shí)驗(yàn)性牙周炎的觀察中可見對牙周炎有明顯的預(yù)防和治療作用。本研究可為眾多牙周病患者帶來福音， 推動(dòng)長白山野生藥材資源開發(fā)， 本研究成果應(yīng)用前景廣闊， 將對提高社會效益和經(jīng)濟(jì)效益具有重要的意義。 　　 　　參考文獻(xiàn) 　　 　　[1]Sanz M, van Winkelhoff A J.Periodontal infections:unde

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