動(dòng)物細(xì)胞工程動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù).ppt
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,回憶:植物細(xì)胞工程包括哪些內(nèi)容?,2.2動(dòng)物細(xì)胞工程,動(dòng)物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段,,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(基礎(chǔ)),動(dòng)物細(xì)胞融合,生產(chǎn)單克隆抗體,動(dòng)物細(xì)胞核移植,2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),在治療燒傷病人時(shí),通常采用的方法是取燒傷病人的健康皮膚進(jìn)行自體移植。但對(duì)一個(gè)大面積燒傷的病人來(lái)說(shuō),自體健康皮膚非常有限,使用他人皮膚來(lái)源不足,而且會(huì)產(chǎn)生排異反應(yīng)。那么,怎樣才能獲得大最的自體健康皮膚呢?,許多動(dòng)物的細(xì)胞能夠分泌蛋白質(zhì),如抗體等。但是,單個(gè)細(xì)胞產(chǎn)生的蛋白質(zhì)量是很少的,怎樣才能獲得大最的分泌蛋白呢?,1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)概念:就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個(gè)細(xì)胞,然后,放在適宜的培養(yǎng)基中,讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖。,你認(rèn)為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是什么?細(xì)胞增殖,動(dòng)物機(jī)體組織,單個(gè)細(xì)胞,原代培養(yǎng),,傳代培養(yǎng),,請(qǐng)閱讀相關(guān)內(nèi)容,思考以下問(wèn)題:1.動(dòng)物組織要怎樣處理使組織塊變成單個(gè)細(xì)胞?2.什么叫細(xì)胞貼壁?3.接觸抑制?,2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程,剪碎、胰蛋白酶或膠原蛋白酶,懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上,稱為細(xì)胞貼壁。,細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂,數(shù)量不斷增多,當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí),細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。,3.什么原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)?4.細(xì)胞在傳至10---50代左右時(shí)會(huì)發(fā)生什么變化?,人們通常將動(dòng)物組織消化后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。,一般來(lái)說(shuō),細(xì)胞在傳至10---50代左右時(shí),增殖會(huì)逐漸緩慢,以至于完全停止,這時(shí)部分細(xì)胞的細(xì)胞核型可能會(huì)發(fā)生變化。當(dāng)繼續(xù)傳代培養(yǎng)時(shí),少部分細(xì)胞會(huì)克服細(xì)胞壽命的自然極限,獲得不死性,這此細(xì)胞已經(jīng)發(fā)生了突變,正在朝著等同于癌細(xì)胞的方向發(fā)展。目前使用的或冷凍保存的正常細(xì)胞通常為10代以內(nèi),以保持細(xì)胞正常的二倍體核型。,貼滿瓶壁的細(xì)胞需要重新用胰蛋白酶等處理,然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng),讓細(xì)胞繼續(xù)增殖。這樣的培養(yǎng)過(guò)程通常被稱為傳代培養(yǎng)。,2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程,動(dòng)物組織細(xì)胞間隙中含有一定量的彈性纖維等蛋白質(zhì),將細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)起來(lái)形成具有一定彈性和韌性的組織和器官。,動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官,,細(xì)胞懸浮液,胰蛋白酶(分解彈性纖維),,10代細(xì)胞,原代培養(yǎng),,50代細(xì)胞,傳代培養(yǎng),,無(wú)限傳代,,單個(gè)細(xì)胞,,加培養(yǎng)液,遺傳物質(zhì)細(xì)胞株未改變,遺傳物質(zhì)細(xì)胞系改變,,,2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程,思考并回答:1、為什么選用動(dòng)物胚胎或幼齡個(gè)體的器官或組織做動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)材料?2、為什么培養(yǎng)前要將組織細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞?,因?yàn)閯?dòng)物細(xì)胞工程的原理是細(xì)胞的增殖,而這些組織或器官上的細(xì)胞生命力旺盛,分裂能力強(qiáng);便于進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。,成塊組織不利培養(yǎng),分散了做成細(xì)胞懸浮液利于培養(yǎng),使細(xì)胞與培養(yǎng)液充分的接觸,有利于培養(yǎng)液的利用,加快了培養(yǎng)的進(jìn)程。,2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程,思考并回答:3、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)能否像綠色植物組織培養(yǎng)那樣最終培養(yǎng)成新個(gè)體?4、在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程中,需用到兩次胰蛋白酶,作用分別是什么?,不能,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)只能使細(xì)胞數(shù)目增多,不能發(fā)育成新的動(dòng)物個(gè)體。能否說(shuō)明動(dòng)物細(xì)胞沒有全能性?那說(shuō)明了什么?,2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程,5、傳代培養(yǎng)的細(xì)胞,如果細(xì)胞形態(tài)發(fā)生了變化,這說(shuō)明了什么?,正在朝著等同于癌細(xì)胞的方向發(fā)展,形成單個(gè)細(xì)胞,思考并回答:6、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的主要成分是什么?較植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基有何獨(dú)特之處?,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基主要成分:葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素和動(dòng)物血清等。獨(dú)特之處有:1、液體培養(yǎng)基2、成分中有動(dòng)物血清等,2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程,P44尋根問(wèn)底胰蛋白酶真的不會(huì)把細(xì)胞消化掉嗎?為什么?,P44旁欄思考題進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞傳代培養(yǎng)時(shí)用胰蛋白酶分散細(xì)胞,說(shuō)明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是什么成分?用胃蛋白酶行嗎?,胰蛋白酶除了可以消化細(xì)胞間的蛋白外,長(zhǎng)時(shí)間的作用也會(huì)消化細(xì)胞膜蛋白,對(duì)細(xì)胞有損傷作用,因此必須控制好胰蛋白酶的消化時(shí)間。,主要是蛋白質(zhì)。胃蛋白酶作用的適宜pH約為2,當(dāng)pH大于6時(shí),胃蛋白酶就會(huì)失去活性。胰蛋白酶作用的適宜環(huán)境pH為7.2~8.4。多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH為7.2~7.4,胃蛋白酶在此環(huán)境中沒有活性,而胰蛋白酶在此環(huán)境中活性較高,因此胰蛋白酶適宜用于細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)的消化。,2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程,P46討論多細(xì)胞動(dòng)物和人體的細(xì)胞都生活在內(nèi)環(huán)境中,根據(jù)你所學(xué)的內(nèi)環(huán)境的知識(shí),思考并討論以下問(wèn)題:體外培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)需要提供哪些物質(zhì)及環(huán)境條件?,無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境。,充足的營(yíng)養(yǎng)供給,2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程,適宜的溫度、適宜的pH和氣體環(huán)境。,無(wú)茵、無(wú)毒的環(huán)境,對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行______處理。通常還要在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的__________,以防培養(yǎng)過(guò)程中的污染。此外,應(yīng)__________培養(yǎng)液,以便清除______,防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)__________造成危害。,無(wú)菌,抗生素,定期更換,代謝產(chǎn)物,細(xì)胞自身,營(yíng)養(yǎng),細(xì)胞體外培養(yǎng)所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)__________,例如,需要有糖、______、__________、無(wú)機(jī)鹽、______等。將細(xì)胞所需的上述營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)按其種類和所需數(shù)量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)鑒,稱為___________。由于人們對(duì)細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)還沒有完全搞清楚,因此,在使用合成培養(yǎng)基時(shí),通常需加入等一些_____________天然成分。,基本相同,氨基酸,促生長(zhǎng)因子,微量元素,合成培養(yǎng)基,血清、血漿,2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件,①無(wú)茵、無(wú)毒的環(huán)境②營(yíng)養(yǎng)③溫度和PH④氣體環(huán)境,細(xì)胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動(dòng)物的______相近,哺乳動(dòng)物多以____________℃為宜。多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為_____________。,溫度和PH,體溫,7.2----7.4,36.5土0.5,氣體環(huán)境細(xì)胞培養(yǎng)所需氣體主要有02和CO2,02是細(xì)胞______所必需的,CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的______。進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,將其置干含95%_______加5%_____的混合氣體的________中進(jìn)行培養(yǎng)。,氣體環(huán)境,代謝,PH,培養(yǎng)箱,CO2,空氣,2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件,1、生產(chǎn)生物制品(病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等)2、檢測(cè)有毒物質(zhì)3、培養(yǎng)正常或各種病變的細(xì)胞,用于生理,病理,藥理等方面的研究,如用于篩選抗癌藥物等,為治療和預(yù)防癌癥及其他疾病提供理論依據(jù)。,說(shuō)出動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的異同?,2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用,閱讀—回答:動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用?P47,說(shuō)出動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的異同,2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用,2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物,離體的植物組織或細(xì)胞在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)條件下可發(fā)育成完整的植株,那么能不能用高產(chǎn)奶牛的一個(gè)體細(xì)胞,培育出一頭高產(chǎn)奶牛呢?,我們已經(jīng)知道,高度分化的植被物組織仍保持著全能性,但動(dòng)物細(xì)胞與植物細(xì)胞不同,動(dòng)物細(xì)胞的全能性會(huì)隨著動(dòng)物細(xì)胞分化程度的提高而逐漸受到限制,分化潛能逐漸變?nèi)?。因此,目前還不能用類似植物組織培養(yǎng)的方法獲得完整的動(dòng)物個(gè)體,用動(dòng)物體細(xì)胞克隆的動(dòng)物,實(shí)際是通過(guò)核移植來(lái)實(shí)現(xiàn)的。,動(dòng)物細(xì)胞核移植的概念動(dòng)物細(xì)胞核移植是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核,移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中,使其重組并發(fā)育成為一個(gè)新的胚胎,這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體(克隆動(dòng)物),哺乳動(dòng)物核移植可以分為___________核移植和_________核移植。動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度______,恢復(fù)其全能性___________。動(dòng)物體細(xì)胞__________高,恢復(fù)其______十困難。因此,動(dòng)物________________的難度也明顯高于___________________。,2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物,動(dòng)物細(xì)胞核移植的類型,胚胎細(xì)胞,體細(xì)胞,低,相對(duì)容易,分化程度,全能性,體細(xì)胞核移植,胚胎細(xì)胞核移植,2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物體細(xì)胞核移植的過(guò)程,卵母細(xì)胞去核,體細(xì)胞中取核,重組細(xì)胞,,重組胚胎,新個(gè)體,,過(guò)程:,刺激使兩細(xì)胞融合,2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物體細(xì)胞核移植的過(guò)程,(1)能利用體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆高產(chǎn)奶牛盧辛達(dá)嗎?請(qǐng)說(shuō)明理由。,(2)如果將克隆高產(chǎn)奶牛盧辛達(dá)的任務(wù)交給你,你將如何對(duì)它進(jìn)行克???,2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物體細(xì)胞核移植的過(guò)程,實(shí)例:1997年,美國(guó)威斯康星州的一個(gè)奶牛場(chǎng)有一頭名叫盧辛達(dá)(Lucinda)的奶牛,年產(chǎn)奶量為30.8t,創(chuàng)造了世界奶牛產(chǎn)奶量最高新紀(jì)錄。目前世界各國(guó)高產(chǎn)奶牛場(chǎng)奶牛,年平均產(chǎn)奶量一般為十幾噸,而我國(guó)奶牛產(chǎn)奶量年平均水平僅為3~4t。,克隆羊培育過(guò)程核移植技術(shù),黑面綿羊去核卵細(xì)胞,白面綿羊乳腺細(xì)胞核,細(xì)胞核移植,,電脈沖刺激,,胚胎移植,,妊娠、出生,重組細(xì)胞,早期胚胎,另一頭綿羊的子宮,克隆羊多利,P49討論,2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物體細(xì)胞核移植的過(guò)程,討論1.在體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到受體卵母細(xì)胞之前,為什么必須先去掉受體卵母細(xì)胞的核?為使核移植的胚胎或動(dòng)物的遺傳物質(zhì)全部來(lái)自有重要利用價(jià)值的動(dòng)物提供的體細(xì)胞,在供體細(xì)胞的細(xì)胞核移至受體細(xì)胞之前,必須將受體細(xì)胞的遺傳物質(zhì)去掉或?qū)⑵淦茐摹?2.用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞,想一想,這是為什么?培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞一般當(dāng)傳代至10~50代左右時(shí),部分細(xì)胞核型可能會(huì)發(fā)生變化,其細(xì)胞遺傳物質(zhì)可能會(huì)發(fā)生突變,而10代以內(nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的二倍體核型。因此,在體細(xì)胞核移植中,為了保證供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ),通常采用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞。,2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物體細(xì)胞核移植的過(guò)程,討論3.你認(rèn)為用上述體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動(dòng)物,是對(duì)體細(xì)胞供體動(dòng)物進(jìn)行了100%的復(fù)制嗎?為什么?克隆動(dòng)物絕大部分DNA來(lái)自于供體細(xì)胞核,但其核外還有少量的DNA,即線粒體中的DNA是來(lái)自于受體卵母細(xì)胞。所以,用教材中所述的方法克隆的動(dòng)物不是供核動(dòng)物完全相同的復(fù)制。此外,即便動(dòng)物的遺傳基礎(chǔ)完全相同,但動(dòng)物的一些行為、習(xí)性的形成與所處環(huán)境有很大關(guān)系,核供體動(dòng)物生活的環(huán)境與克隆動(dòng)物所生活的環(huán)境不會(huì)完全相同,其形成的行為、習(xí)性也不可能和核供體動(dòng)物完全相同,從這一角度看,克隆動(dòng)物不會(huì)是核供體動(dòng)物100%的復(fù)制。,2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物體細(xì)胞核移植的過(guò)程,2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景,說(shuō)出體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景?,體細(xì)胞核移植技術(shù)在畜牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生,以及其他領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用前景。,在畜牧生產(chǎn)中,利用體細(xì)胞克隆技術(shù)可以加速家畜_____________進(jìn)程,促進(jìn)______________繁育;在保護(hù)_______瀕危物種方而,可望利用體細(xì)胞核移植技術(shù)增加這些動(dòng)物的_______________。,遺傳改良,優(yōu)良畜群,瀕危,存活數(shù)量,在醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)城,轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物可以作為_________,生產(chǎn)許多珍貴的___________;在治療人類疾病時(shí),轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物細(xì)胞、組織和器官可以作為____________的供體;人的核移植胚胎__________經(jīng)過(guò)誘導(dǎo)分化,形成相應(yīng)的組織、器官后,可以用于_____________的移植。,生物反應(yīng)器,醫(yī)用蛋白,異種移植,干細(xì)胞,組織器官,2、瀕危物種增數(shù)量。,3、醫(yī)用蛋白和移植。,1、家畜的遺傳改良。,2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景,此外,研究克隆動(dòng)物和克隆細(xì)胞可使人類吏深人地了解________________過(guò)程;用克隆動(dòng)物做____________,能使人們更好的______________的發(fā)展過(guò)程和治療疾病。,胚胎發(fā)育及衰老,疾病模型,追蹤研究疾病,3、胚胎發(fā)育及衰老。,4、克隆動(dòng)物做模型。,2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)的存在的問(wèn)題,1996年在英國(guó)出生的克隆羊,已經(jīng)死亡。它比自然出生的羊壽命縮短了5-6年,你認(rèn)為可能是什么原因造成的?,說(shuō)出:體細(xì)胞核移植技術(shù)的存在的問(wèn)題?,盡管體細(xì)胞核移植技術(shù)已經(jīng)在許多種動(dòng)物中獲得成功,但其成功率仍然非常低,產(chǎn)下的活克隆動(dòng)物占移植克降胚胎的比率平均不到1%??私抵πg(shù)的各個(gè)環(huán)節(jié)也有待進(jìn)一步改進(jìn)。此外,一些人士指出,絕大多數(shù)克隆動(dòng)物還存在健康問(wèn)題,許多克隆動(dòng)物表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷,如體型過(guò)大,異常肥胖、困難、臟器缺陷,免疫失調(diào)等。對(duì)克隆動(dòng)物食品的安全性問(wèn)題也存有爭(zhēng)議??傊?,體細(xì)胞核移植技術(shù)的研究仍存繼續(xù)深入,人類對(duì)克隆技術(shù)的應(yīng)用還有許多問(wèn)題需要解決。期待在不遠(yuǎn)的將來(lái),克隆技術(shù)能更好地造福于人類。,P50思考與探究1.幼齡與老齡動(dòng)物的組織細(xì)胞比較,分化程度低的與分化程度高的組織細(xì)胞比較,哪一種更易于培養(yǎng)?思考一下,這是什么道理?細(xì)胞的衰老與動(dòng)物機(jī)體的衰老有著密切的關(guān)系,細(xì)胞的增殖能力與供體的年齡有關(guān),幼齡動(dòng)物細(xì)胞增殖能力強(qiáng),有絲分裂旺盛,老齡動(dòng)物則相反。所以,一般來(lái)說(shuō)幼年動(dòng)物的組織細(xì)胞比老年動(dòng)物的組織細(xì)胞易于培養(yǎng)。同樣,組織細(xì)胞的分化程度越低,則增殖能力越強(qiáng),所以更容易培養(yǎng)。,P50思考與探究2.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)要經(jīng)過(guò)脫分化的過(guò)程嗎?為什么?脫分化又稱去分化,是指分化細(xì)胞失去特有的結(jié)構(gòu)和功能變?yōu)榫哂形捶只?xì)胞特性的過(guò)程。植物的任何一部分,甚至單個(gè)細(xì)胞都具有長(zhǎng)成完整植株的能力。但要發(fā)育成完整植株,必須先脫分化,脫分化的細(xì)胞具有發(fā)育成任何組織的能力,然后進(jìn)行再分化,形成完整植株。植物細(xì)胞培養(yǎng)主要用于農(nóng)林生產(chǎn)中的作物、苗木育種,快速繁育種苗、培育無(wú)病毒植株等,這就要求植物的組織或細(xì)胞先進(jìn)行脫分化。動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)有各種用途,一般而言,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不需經(jīng)過(guò)脫分化過(guò)程。因高度分化的動(dòng)物細(xì)胞發(fā)育潛能變窄,失去了發(fā)育成完整個(gè)體的能力,所以,動(dòng)物細(xì)胞也就沒有類似植物組織或細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)的脫分化過(guò)程了。要想使培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞定向分化,通常采用定向誘導(dǎo)動(dòng)物干細(xì)胞,使其分化成所需要的組織或器官。,P50思考與探究3.1997年,美國(guó)威斯康星州的一個(gè)奶牛場(chǎng)有一頭名叫盧辛達(dá)(Lucinda)的奶牛,年產(chǎn)奶量為30.8t,創(chuàng)造了世界奶牛產(chǎn)奶量最高新紀(jì)錄。目前世界各國(guó)高產(chǎn)奶牛場(chǎng)奶牛,年平均產(chǎn)奶量一般為十幾噸,而我國(guó)奶牛產(chǎn)奶量年平均水平僅為3~4t。(1)能利用體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆高產(chǎn)奶牛盧辛達(dá)嗎?請(qǐng)說(shuō)明理由??梢杂皿w細(xì)胞核移植技術(shù)克隆高產(chǎn)奶牛盧辛達(dá)。盧辛達(dá)的產(chǎn)奶量很高,說(shuō)明它有高產(chǎn)奶的遺傳基礎(chǔ),利用盧辛達(dá)的體細(xì)胞克隆的奶牛其遺傳物質(zhì)基本上全部來(lái)自該奶牛,其克隆牛具有高產(chǎn)的遺傳基礎(chǔ),如果精心培育和飼養(yǎng),有可能在世界范圍內(nèi)推廣,克隆牛再與高產(chǎn)的公牛自然繁殖,可得到很多高產(chǎn)的后代,從而加快奶牛改良進(jìn)程。但同時(shí)需注意,該克隆牛不能無(wú)限制地推廣,其數(shù)量不宜過(guò)多,尤其是在小范圍內(nèi)不能無(wú)限的繁殖,以避免奶牛群出現(xiàn)近親繁殖而引起種質(zhì)衰退。,P50思考與探究3.1997年,美國(guó)威斯康星州的一個(gè)奶牛場(chǎng)有一頭名叫盧辛達(dá)(Lucinda)的奶牛,年產(chǎn)奶量為30.8t,創(chuàng)造了世界奶牛產(chǎn)奶量最高新紀(jì)錄。目前世界各國(guó)高產(chǎn)奶牛場(chǎng)奶牛,年平均產(chǎn)奶量一般為十幾噸,而我國(guó)奶牛產(chǎn)奶量年平均水平僅為3~4t。(2)如果將克隆高產(chǎn)奶牛盧辛達(dá)的任務(wù)交給你,你將如何對(duì)它進(jìn)行克隆?首先從盧辛達(dá)耳朵(也可用別的組織、器官,耳朵在活體上容易取)上剪取一小塊組織,在體外培養(yǎng)獲得該組織(如軟骨組織)的細(xì)胞。從屠宰場(chǎng)取廢棄的牛卵巢,抽取卵母細(xì)胞體外培養(yǎng)成熟。用顯微針去除卵母細(xì)胞的核,再將耳細(xì)胞注入卵母細(xì)胞,用電刺激方法使卵母細(xì)胞與體細(xì)胞融合,這時(shí)供體核就進(jìn)入了受體卵母細(xì)胞,再用電刺激或化學(xué)物質(zhì)激活注入了體細(xì)胞核的卵母細(xì)胞,使其完成減數(shù)分裂和發(fā)育過(guò)程。核移植胚胎在體外短時(shí)間培養(yǎng)后,挑選正常卵裂的胚胎植入經(jīng)同期發(fā)情處理的受體母牛體內(nèi)。,P50思考與探究4.體細(xì)胞核移植技術(shù)在研究和應(yīng)用上還存在什么問(wèn)題?請(qǐng)你查閱資料,了解這方面的前沿動(dòng)態(tài)。提示:在研究方面,克隆動(dòng)物基因組重新編程的機(jī)制尚不清楚,克隆技術(shù)效率低,克隆動(dòng)物畸形率高、死亡率高、易出現(xiàn)早衰等問(wèn)題。這些問(wèn)題尚在研究中。在應(yīng)用上,生產(chǎn)克隆動(dòng)物費(fèi)用昂貴,距大規(guī)模應(yīng)用還有一定距離。,- 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